R. Skowronek: Hormonozależność metabolizmu

Spis treści

Wykaz skrótów używanych w tekście . 9
Wykaz tabel i rycin .  13
1. WSTĘP . 19
1.1. Metabolizm ksenobiotyków . 19
1.2. Nadrodzina cytochromu P450 . 20
1.2.1. Podrodzina CYP2C . 22
1.2.2. Podrodzina CYP3A . 22
1.3. Mechanizmy ekspresji cytochromów P450 . 23
1.3.1. Receptory jądrowe . 24
1.3.2. Potencjalnie istotne czynniki transkrypcyjne . 26
1.4. Czynniki regulatorowe ekspresji hormonozależnych białek CYP . 28
1.4.1. Różnice płciowe . 29
1.4.2. Regulacja hormonalna ekspresji białek CYP . 30
1.4.2.1. Hormon wzrostu .  30
1.4.2.2. Hormony płciowe . 34
1.5. Analogi gonadoliberyny . 35
1.5.1. Postacie farmaceutyczne leku . 37
1.5.2. Wpływ analogów gonadoliberyny na wydzielanie hormonu wzrostu i ekspresję białek CYP  .  38
2. ZAŁOŻENIA I CEL PRACY . 41
3. MATERIAŁ I METODY . 43
3.1. Schemat doświadczenia . 43
3.2. Zwierzęta doświadczalne i analogi GnRH . 44
3.3. Oznaczanie stężeń hormonów w krwi . 47
3.4. Ocena histologiczna narządów . 48
3.5. Oznaczanie ekspresji białek cytochromów P450 w wątrobie . 48
3.5.1. Western blotting . 49
3.5.2. Metoda immunohistochemiczna .  50
3.6. Oznaczanie ekspresji mRNA . 51
3.6.1. Ekspresja mRNA receptora GnRH w przysadce mózgowej . 54
3.6.2. Ekspresja mRNA cytochromów P450 w wątrobie . 54
3.6.3. Ekspresja mRNA czynników transkrypcyjnych w wątrobie . 56
3.7. Analiza statystyczna . 58
4. WYNIKI . 59
4.1. Ekspresja mRNA receptora GnRH w przysadce mózgowej . 59
4.2. Oznaczenia hormonów we krwi . 60
4.2.1. Stężenie hormonów płciowych . 61
4.2.1.1. Stężenie 17β-estradiolu . 61
4.2.1.2. Stężenie progesteronu . 62
4.2.1.3. Stężenie testosteronu .  64
4.2.2. Dobowy profil wydzielania hormonu wzrostu . 65
4.3. Ocena morfologiczna jajników i wątroby . 69
4.3.1. Masa narządów . 69
4.3.2. Ocena mikroskopowa jajników . 70
4.3.3. Ocena mikroskopowa wątroby . 71
4.4. Ekspresja mRNA cytochromów P450 w wątrobie . 73
4.4.1. mRNA CYP3A1 . 73
4.4.2. mRNA „żeńskich” izoform CYP 2C12 i 3A9 .  74
4.4.2.1. mRNA CYP2C12 .  74
4.4.2.2. mRNA CYP3A9 . 74
4.4.3. mRNA „męskich” izoform CYP 2C11 i 3A2 . 76
4.4.3.1. mRNA CYP2C11 . 76
4.4.3.2. mRNA CYP3A2 . 76
4.5. Ekspresja i lokalizacja białek CYP . 77
4.5.1. Izoforma CYP3A1 . 78
4.5.2. Białka „żeńskich” izoform CYP 2C12 i 3A9 . 81
4.5.2.1. Izoforma CYP2C12 . 81
4.5.2.2. Izoforma CYP3A9 . 83
4.5.3. Białka „męskich” izoform CYP2C11 i CYP3A2 . . 85
4.6. Ekspresja mRNA czynników transkrypcyjnych w wątrobie . 86
4.6.1. Wpływ podawania roztworu busereliny . 86
4.6.2. Wpływ podawania roztworu cetroreliksu . 89
4.6.3. Wpływ podawania zawiesiny busereliny z jonami cynku (II) . 91
4.6.4. Wpływ podawania zawiesiny cetroreliksu z jonami cynku (II) . 94
5. DYSKUSJA . 99
5.1. Efektywność farmakologicznej desensytyzacji przysadki mózgowej . 101
5.2. Farmakologiczna desensytyzacja przysadki mózgowej a wydzielanie hormonu wzrostu . 106
5.3. Ekspresja cytochromów P450 w wątrobie w warunkach farmakologicznej desensytyzacji przysadki mózgowej . 110
5.4. Ekspresja czynników transkrypcyjnych w wątrobie w warunkach farmakologicznej desensytyzacji przysadki mózgowej . 115
5.5. Podsumowanie . 125
6. WNIOSKI . 129
7. PIŚMIENNICTWO . 131
8. STRESZCZENIE . 147
9. ABSTRACT . 151